Wpływ składników antyagregacyjnych zawartych w ekstrakcie pomidorowym na aktywność trombocytów w warunkach in vitro i ex vivo: badania prowadzone z wykorzystaniem kaniulacji u zdrowych ludzi.

Wpływ składników antyagregacyjnych zawartych w ekstrakcie pomidorowym na aktywność trombocytów w warunkach in vitro i ex vivo: badania prowadzone z wykorzystaniem kaniulacji u zdrowych ludzi.

METODYKA

• Zastosowano kryterium wyłączenia z diety osób badanych wszelkich środków spożywczych specjalnego przeznaczenia żywieniowego na 1 miesiąc przed rozpoczęciem badań właściwych.
• Zastosowano kryterium odstawienia przez osoby badane produktów leczniczych o wskazaniach lub pośrednim potencjale zdolności do modulowania funkcji płytkowej na 10 dni przed rozpoczęciem badań właściwych.
• Zastosowano kryterium włączenia do badań wyłącznie osób nieobarczonych historią chorób ciężkich lub zaburzeń hemostatycznych.

Badania in vitro

Pomiar aktywności agregacyjnej z wykorzystaniem wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC)

Czynniki agregacyjne: tAF (total active fraction) w ramach 3 frakcji: AF1, AF1 i AF3

Próbki krwi pobierane były poprzez nakłuwanie żył od osób pomiędzy 18 a 60 rokiem życia, które wykazywały normalną aktywność agregacyjną. Krew, która po pobraniu przenoszona była do probówek z cytrynianem sodu poddawana była wirowaniu w celu otrzymania osocza bogatopłytkowego. Otrzymany materiał biologiczny stymulowano ADP, kolagenem lub kwasem arachidonowym.

Badania ex vivo

Schemat badawczy opierał się na kaniulacji żył osób badanych i pobieraniu dwóch prób krwi pełnej na czczo, pomiędzy godziną 07:00 a 08:00 rano. Natychmiast po pobraniu drugiej próbki krwi osoby objęte badaniami, spożywały napój  z substancją aktywną zawartą w preparacie ZAAX^TM  lub placebo, po czym po 1.5, 3.0 i 6.0 godzinach były ponownie poddawane pobieraniu krwi metodą kaniulacji. Po każdym pobraniu krwi osoby badane uzupełniały płyny 25mL wody. Po pobraniu krwi na 3h po spożyciu napoju z substancją aktywną zawartą w preparacie  ZAAX^TM lub placebo osoby badane spożywały standaryzowaną porcję żywności o wartości energetycznej 465kJ i zawierające 1.8 g białka, 19.9 g węglowodanów oraz 2,6 g tłuszczu (producent komercyjny).

Od 15 osób pobierano krew w celu przeprowadzenia dodatkowych testów: natychmiast po spożyciu napoju oraz po 3, 12 i 24 godzinach (pojedyncze nakłucia żyły).

Dokonywano pomiarów agregacji płytkowej z uwzględnieniem obecności  ADP, kolagenu, kwasu arachidonowego oraz trombiny jako czynników indukujących funkcję agregacyjną płytek krwi.

• Metody pomiarowe: koagulometria (agregometria)
• Wyniki pomiarowe wyrażano jako zmiany procentowe stopnia agregacji przed i po spożywaniu napoju z substancją  aktywną zawartą w preparacie ZAAX^TM lub placebo.

WYNIKI

• Bardzo dobre wyniki hamowania aktywności agregacyjnej trombocytów dla wszystkich frakcji tAF w obecności zarówno ADP o stężeniu 7,5 µmol/L, jak i kolagenu o stężeniu 3 mg/L, przyjmującego wartości od 64,9% do 67,1%. P value na poziomie <0,001.

• Wszystkie frakcje tAF wykazywały znaczącą aktywność antyagregacyjną w obecności każdego czynnika indukującego funkcję płytkową: ADP, kolagenu, kwasu arachidonowego oraz trombiny.

Wyniki badań ex vivo

• Średni spadek agregacji płytkowej o 21,3% po spożyciu napoju z substancją aktywną zawartą w preparacie ZAAX^TM – w porównaniu do wyników wyjściowych.
  P value na poziomie <0,001.

Analiza statystyczna

• Wartości granicznego stopnia istotności (wartość p) spełniają warunki tzw. wysokiego stopnia istotności statystycznej, co wskazuje na wysokie prawdopodobieństwo, iż prezentowane wyniki dotyczące większej populacji będą reprezentatywne dla 99% osób badanych.